分享:如何保证小鼠术后较高的死亡率 v2.0版

2020-04-09
本期的推送凝聚了养老鼠的王敎授消失的这小半年内的血与泪。
如果在看这期推送的小伙伴经常会做一些小鼠手术的话(尤其是需要开腹翻肠子的),那这期推送或许可以帮助你少走很多弯路

进入正题

参加过去年上海实验动物科技论坛的小伙伴们应该都知道,王敎授会做小鼠肾移植手术,成功率可以高达90%以上
但是,会后不久发生了一件很可怕的事,王敎授的小鼠肾移植手术死亡率达到96.67%(术后小鼠状态不佳、3天内死亡、解剖后发现不同程度的小肠坏死)
那段时间觉得小鼠看着我都是这个表情
在经历了30例小鼠肾移植只有1例存活的失败后,王敎授决定坐下来好好思考一下,究竟是什么原因
手术器械都经过121℃高温消毒,术野消毒完全,手术血管吻合良好,无大出血、吻合口无狭窄的情况,术中及术后保温都做得很好
除了由于购买限制,不得已将戊巴比妥换成了三溴乙醇之外,其他变量几乎不存在(还有术者胖了十斤,这个应该不影响)
于是王敎授把关注点放在了麻醉剂上,为了排除麻醉剂的原因,先安排了一波小实验
一组5只Babl/C雄鼠,腹腔注射三溴乙醇,剂量为380mg/kg,麻醉后放于保温垫上待其苏醒后,单独饲养,观察小鼠麻醉后的状态


经过大量文献资料的查询


一篇发表于《NATURE LAB ANIMAL》名为《Adverse effects of tribromoethanol as used in the production of transgenic mice》的论文引起了王敎授的关注

文中提到,在注射三溴乙醇的小鼠中观察到了炎症浸润和腹膜炎相关的腹膜下肌纤维局灶性至弥漫性坏死、浆膜下肝细胞坏死、肠壁浆膜下肌纤维坏死等现象
通俗一点:使用三溴乙醇会引起腹腔炎症,导致腹腔粘连,肝脏及肠道损伤
这些副作用是由三溴乙醇本身而非其溶剂产生的,并且这些副作用会随着注射浓度的增加而增强
在小鼠肾移植手术中,一般会将受体小鼠的肠道翻出腹腔,并用湿纱布包裹
这样做可以很好的暴露术区,但会对肠道产生一定的损伤,不过实践证明这样的损伤一般不会影响到小鼠术后的存活率
麻药对肠道的损伤加上手术对肠道损伤,共同作用下,最终导致小鼠术后死亡?
为了证明这个想法,王敎授更换了麻醉药再次进行小鼠肾移植手术

经过10例小鼠肾移植手术的验证,这些小鼠在术后全部存活超过1周以上
至此,翻了小半年车的老司机终于把车翻正了,从三溴乙醇的深坑中爬了出来
~总结一下~
如果想要保证
小鼠术后较高死亡率的话

可以使用三溴乙醇

如果不想的话
!!千万别再用三溴乙醇啦!!
那用什么好呢?

下一期王敎授会给大家介绍
几种比较好用的替代麻醉剂

敎授有话说
实验动物麻醉是动物实验中的重要环节,选择适宜的麻醉剂是十分重要的,三溴乙醇具有起效快,安全范围大(350~800mg/kg),肌肉松弛良好等优点

该麻醉剂广泛应用于基因工程大小鼠胚胎移植手术,但其是否能应用于动物的日常麻醉存在较大争议,在动物实验中使用三溴乙醇需要经过IACUC审查和批准


参考文献
[1]詹红微, 邱泽文, 李慧玲, et al. 三种麻醉药物对小鼠麻醉效果的比较[J]. 实验动物科学, 2012(04):23-28.
[2]李莉, 华再东, 任红艳, et al. 三溴乙醇对小鼠麻醉效果的研究[J]. 湖北农业科学, 2015, v.54;No.549(24):226-227.

[3]Zeller W ,   Meier G ,   Burki K , et al. Adverse effects of tribromoethanol as used in the production of transgenic mice[J]. Laboratory Animals, 1998, 32(4):407-413.

本文转载公众号:养老鼠的王教授,一个动物实验界有趣,有干货,讲知识的公众号,值得关注分享给大家。



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